Tm值（熔解温度，Melting Temperature）是指DNA双链在加热过程中有50%解离为单链时的温度。这一温度主要与核酸序列中G（鸟嘌呤）和C（胞嘧啶）的含量有关，GC含量越高，Tm值也越高。Tm值是衡量核酸双链稳定性的重要参数，在分子生物学实验中具有关键作用。在导流杂交技术中，Tm值对于确保高效且特异性的杂交反应至关重要。

导流杂交时在多基因位点检测的温控方面，目前的导流杂交平台普遍采用统一杂交温度策略，即根据所有探针的平均Tm值设定一个恒定的杂交温度。在面对不同Tm值差异较大的探针组合时，这种统一杂交温度的策略就存在明显局限性。一方面，低Tm值探针在较高温度下难以形成稳定双链，导致灵敏度下降；另一方面，高Tm值探针在较低温度下可能容忍较多错配结合，从而降低检测特异性。因此这种温控方法缺乏对温度动态变化过程的有效控制，无法根据不同探针的热力学特性提供差异化的杂交条件，限制了不同Tm值探针在复杂样本或多重突变检测中的应用。

本发明涉及基因杂交的技术领域，更具体地，涉及一种时序温控的导流杂交多基因位点检测方法及系统，方法包括：芯片安放；预热和初始杂交；温度波动评估；低Tm探针杂交；温度波动评估；高Tm探针杂交；杂交模块将杂交液排出后对基因芯片进行洗涤和显色。本发明的方案能够跟据各探针的Tm值设计阶梯式升温程序，确保每个探针在其最佳温度窗口下完成高效结合，同时还能实时监测并评估温度波动情况，动态调整温控参数，从而保证杂交过程的稳定性和一致性。
 
目的在于克服现有技术中采用统一杂交温度的温控方法无法根据不同探针的热力学特性提供差异化杂交条件的不足，提供一种时序温控的导流杂交多基因位点检测方法及系统，本发明的方案能够根据各探针的Tm值设计阶梯式升温程序，确保每个探针在其最佳温度窗口下完成高效结合，并且还能实时监测并评估温度波动情况，动态调整温控参数，从而保证杂交过程的稳定性和一致性。